Het is de bedoeling om al je kaarten kwijt te raken door de kaarten uit je hand op de laatst gespeelde kaart te plaatsen. De kaart die je speelt moet dezelfde kleur of hetzelfde nummer hebben als de laatste kaart die is gespeeld. Er zijn ook speciale 'pestkaarten' die je kunt spelen om je tegenstanders dwars te zitten. Als je nog maar één kaart over hebt, moet je UNO roepen om de andere spelers te waarschuwen dat je op het punt staat te winnen!

Voorbeelden van pestkaarten:

‘Reverse’ – deze verandert de richting waarin wordt gespeeld tot een volgende Reverse-kaart wordt gespeeld

‘Wild’ -  deze kaart kun je op elke kleur spelen

‘Skip’ – als deze kaart is gespeeld, moet de volgende speler een beurt overslaan

Je kunt desgewenst ook zelf de spelregels veranderen. Maak het spel eenvoudiger of juist ingewikkelder door verschillende regels aan of uit te zetten. Als je bijvoorbeeld de regel "Jump-in" hebt ingeschakeld, kun je zelfs een kaart spelen terwijl je nog niet aan de beurt bent, mits dit exact dezelfde kaart is als boven op de stapel ligt. Een andere grappige regel is “UNO 7-0” – elke keer als een 0 wordt gespeeld moet iedereen zijn hele hand kaarten aan de volgende speler geven, terwijl de speler die een 7 heeft gespeeld zelf mag kiezen met wie hij of zij van kaarten wisselt. Maak je eigen combinaties van verschillende regels voor telkens weer een andere spelervaring!

In de WiiWare-versie kun je kaarten kiezen door simpelweg met de Wii-afstandsbediening op het beeld te richten en op de A-knop te drukken. Als iemand vergeet "UNO" te roepen bij de laatste kaart, kun je hem of haar uitdagen door op de B-knop te drukken!

In de versie voor de Nintendo DSi kun je de stylus gebruiken om de kaarten op het touchscreen te spelen. Tik op de kaarten om ze te bekijken, en tik twee keer op de kaart die je wilt spelen. Als je liever een meer traditionele besturing gebruikt, kun je ook de richtingsknop gebruiken om kaarten te kiezen.